ABSTRACT
Introduction: Echinoderm coelomocytes have traditionally been investigated through a morphological approach using light microscopy, which relies on the idea of constant cell shape as a stable character. However, this can be affected by biotic or abiotic conditions. Objective: To analyze if the consistency in cell morphology offered by the cytocentrifugation method, might be used as a convenient tool to study echinoderm coelomocytes. Methods: Cells of Echinaster (Othilia) brasiliensis (Asteroidea), Holothuria (Holothuria) tubulosa (Holothuroidea), Eucidaris tribuloides, Arbacia lixula, Lytechinus variegatus, and Echinometra lucunter (Echinoidea) were spread on microscope slides by cytocentrifugation, stained, and analyzed through light microscopy. Additionally, fluorescence microscopy, scanning electron microscopy, and energy-dispersive x-ray spectroscopy were applied to cytospin preparations, to complement the analysis of granular and colorless spherulocytes of Eucidaris tribuloides. Results: Altogether, 11 cell types, including phagocytes, spherulocytes, vibratile cells, and progenitor cells were identified in the samples analyzed. The granular spherulocyte, a newly-described cell type, was observed in all Echinoidea and was very similar to the acidophilic spherulocytes of Holothuria (Holothuria) tubulosa. Conclusions: Cytocentrifugation proved to be versatile, either as the main method of investigation in stained preparations, or as a framework on which other procedures may be performed. Its ability to maintain a constant morphology allowed accurate correspondence between live and fixed/stained cells, differentiation among similar spherulocytes as well as comparisons between similar cells of Holothuroidea and Echinoidea.
Introducción: Los celomocitos de equinodermos se han investigado tradicionalmente a través de un enfoque morfológico utilizando microscopía óptica, que se basa en la idea de la forma celular constante como un carácter estable. Sin embargo, esto puede verse afectado por condiciones bióticas o abióticas. Objetivo: Analizar si la consistencia en la morfología celular que ofrece el método de citocentrifugación podría utilizarse como una herramienta conveniente para estudiar los celomocitos de equinodermos. Métodos: Células de Echinaster (Othilia) brasiliensis (Asteroidea), Holothuria (Holothuria) tubulosa (Holothuroidea), Eucidaris tribuloides, Arbacia lixula, Lytechinus variegatus y Echinometra lucunter (Echinoidea) se esparcieron en portaobjetos de microscopio por citocentrifugación, se tiñeron y analizaron mediante microscopía óptica. Adicionalmente, se aplicó microscopía de fluorescencia, microscopía electrónica de barrido y espectroscopía de rayos X con dispersión de energía a las preparaciones de citoespina, para complementar el análisis de los esferulocitos granulares e incoloros de Eucidaris tribuloides. Resultados: En total, se identificaron en las muestras analizadas 11 tipos de células, incluidos fagocitos, esferulocitos, células vibrátiles y células progenitoras. El esferulocito granular, un tipo de célula recién descrito, se observó en todos los Echinoidea y fue muy similar a los esferulocitos acidófilos de Holothuria (Holothuria) tubulosa. Conclusiones: La citocentrifugación demostró ser un método bastante versátil, ya sea como el método principal de investigación en preparaciones teñidas o como un marco en el que se pueden realizar otros procedimientos. Su capacidad para mantener una morfología constante permitió una correspondencia precisa entre las células vivas y las células fijas/teñidas, la diferenciación entre esferulocitos similares, así como comparaciones entre células similares de Holothuroidea y Echinoidea.